基礎生物化學實驗原理與方法

目錄
上篇 原理
第一章 緒論 2
第二章 常用生物材料及其保存技術原理 4
第一節(jié) 生物化學實驗常用生物材料 4
第二節(jié) 材料的取樣與保存技術原理 6
第三章 生物分子提取的一般原則 7
第一節(jié) 組織細胞的破碎方法 8
第二節(jié) 生物小分子的提取 9
第三節(jié) 生物大分子的提取 11
第四章 分離純化技術和生物化學檢測技術 16
第一節(jié) 沉淀技術 16
第二節(jié) 離心技術 21
第三節(jié) 層析技術 24
第四節(jié) 電泳技術 33
第五節(jié) 生物化學檢測方法 38
第六節(jié) 生物化學實驗中的計算機輔助設計 52
下篇 方法
第五章 蛋白質(zhì) 56
實驗一 植物組織中氨基酸總量的測定—— 茚三酮溶液顯色法 56
實驗二 氨基酸的紙層析 59
實驗三 谷物種子中賴氨酸含量的測定 64
實驗四 脯氨酸含量的測定 66
實驗五 蛋白質(zhì)的鹽析與透析 68
實驗六 蛋白質(zhì)含量的測定方法 69
實驗七 蛋白質(zhì)的兩性反應和等電點的測定 85
實驗八 等電聚焦電泳測定蛋白質(zhì)的等電點 88
實驗九 對流免疫電泳 92
實驗十 單向定量免疫電泳 95
實驗十一 雙向免疫擴散 97
實驗十二 免疫印跡 98
第六章 酶及維生素 103
實驗十三 酶的高效性及特異性 103
實驗十四 環(huán)境條件對酶促反應的影響 106
實驗十五 淀粉酶活性測定 109
實驗十六 脂肪酶活性測定 112
實驗十七 過氧化氫酶活性測定 114
實驗十八 硝酸還原酶活性測定 116
實驗十九 氮藍四唑法測定超氧化物歧化酶活性 120
實驗二十 米氏常數(shù)的測定 122
實驗二十一 苯丙氨酸解氨酶的提取、初步純化及活性測定 126
實驗二十二 親和層析純化胰蛋白酶 129
實驗二十三 植物過氧化物酶同工酶的聚丙烯酰胺凝膠電泳 136
實驗二十四 瓊脂糖凝膠電泳分離乳酸脫氫酶同工酶及乳酸脫氫酶總活性測定 143
實驗二十五 還原型維生素C含量的測定 147
實驗二十六 總維生素C 含量的測定 150
第七章 核酸 153
實驗二十七 CTAB 法提取植物總DNA 153
實驗二十八 SDS-苯酚法提取動物總DNA 157
實驗二十九 質(zhì)粒DNA 的制備與純化 160
實驗三十 酵母RNA 的分離及組分鑒定(濃鹽法) 164
實驗三十一 核苷酸分析 167
實驗三十二 醋酸纖維素薄膜電泳分離核苷酸 170
實驗三十三 DNA 的瓊脂糖凝膠電泳 173
實驗三十四 植物總mRNA 的提取 177
實驗三十五 PCR 技術擴增DNA 179
實驗三十六 Southern 印跡 181
第八章 糖類 186
實驗三十七 還原糖和總糖含量的測定(3，5-二硝基水楊酸比色法) 186
實驗三十八 可溶性糖的硅膠G 薄層層析 189
實驗三十九 可溶性糖的測定(蒽酮比色法) 192
實驗四十 谷物淀粉含量的測定(旋光法) 194
實驗四十一 植物組織淀粉和纖維素含量的測定 197
第九章 脂類 200
實驗四十二 粗脂肪的定量測定 200
實驗四十三 油料種子油脂含量的快速測定(折光儀法) 202
實驗四十四 卵黃中卵磷脂的提取和鑒定 205
實驗四十五 油脂皂化值的測定 207
實驗四十六 油脂碘值的測定 208
實驗四十七 油脂酸值的測定 210
第十章 DNA 克隆與表達 212
實驗四十八 DNA 的克隆 212
實驗四十九 蛋白質(zhì)表達 217
實驗五十 表達產(chǎn)物檢測 ——SDS-PAGE 220
第十一章 電子生物化學實驗 224
實驗五十一 DNA 序列下載與格式轉(zhuǎn)換 224
實驗五十二 真核生物基因結(jié)構的預測 226
實驗五十三 蛋白質(zhì)基本性質(zhì)與功能分析 228
實驗五十四 蛋白質(zhì)系統(tǒng)發(fā)育樹的構建 232
實驗五十五 蛋白質(zhì)相互作用預測 235
主要參考文獻 237
附錄一 實驗室基本知識 238
附錄二 硫酸銨飽和度計算表及相關參數(shù) 253