食品微生物學實驗技術

第一部分食品微生物學基本實驗技術/1
一、無菌概念和無菌操作技術1
實驗1實驗室環(huán)境要求1
實驗2無菌操作技術5

二、培養(yǎng)基的制備與滅菌方法8
實驗3玻璃器皿的洗滌及包扎8
實驗4培養(yǎng)基的制備10
實驗5干熱滅菌12
實驗6高壓蒸汽滅菌14
實驗7紫外線滅菌15
實驗8微孔濾膜過濾除菌16

三、顯微鏡及顯微技術17
實驗9普通光學顯微鏡17
實驗10相差顯微鏡的使用20
實驗11暗視野光學顯微鏡的使用21
實驗12熒光顯微鏡的使用22

四、微生物的染色、形態(tài)及結(jié)構觀察24
實驗13細菌的簡單染色法24
實驗14革蘭氏染色法26
實驗15細菌的芽孢染色29
實驗16莢膜染色31
實驗17鞭毛染色33
實驗18放線菌的形態(tài)結(jié)構觀察34
實驗19酵母菌細胞的死活鑒別及形態(tài)觀察36
實驗20霉菌的形態(tài)結(jié)構觀察37
實驗21微生物細胞大小的測量39

五、微生物的純培養(yǎng)41
實驗22微生物的分離、純化與接種技術41
實驗23厭氧微生物的培養(yǎng)44
實驗24病毒的培養(yǎng)45
實驗25食用真菌的培養(yǎng)47

六、微生物數(shù)量的測定50
實驗26郝氏霉菌計數(shù)法50
實驗27血細胞計數(shù)板直接計數(shù)法測定微生物生長及酵母發(fā)芽率51
實驗28平板計數(shù)法54
實驗29光電比濁計數(shù)法56
實驗30單細胞微生物生長曲線的制作58
實驗31噬菌體效價的測定60

七、環(huán)境因素對微生物生長的影響61
實驗32化學因素對微生物生長的影響61
實驗33紫外線對微生物生長的影響63
實驗34溫度對微生物生長的影響64
實驗35滲透壓及pH對微生物生長的影響68
實驗36抑菌劑對微生物生長的影響70

八、微生物對含碳化合物的分解和利用73
實驗37唯一碳源實驗73
實驗38糖、醇、糖苷類碳源的分解實驗74
實驗39淀粉水解實驗75
實驗40纖維素水解實驗76
實驗41果膠分解實驗77
實驗42油脂水解實驗78
實驗43甲基紅（M.R.）實驗78
實驗44乙酰甲基甲醇實驗79
實驗45檸檬酸鹽實驗80

九、微生物對含氮化合物的分解和利用81
實驗46氮源同化實驗81
實驗47明膠液化實驗82
實驗48石蕊牛乳實驗83
實驗49尿素實驗84
實驗50產(chǎn)硫化氫實驗84
實驗51吲哚實驗85
實驗52過氧化氫酶實驗86

十、微生物基因突變及基因轉(zhuǎn)移87
實驗53微生物的誘發(fā)突變87
實驗54細菌的接合作用90
實驗55Ames致突變和致癌試驗91

十一、微生物的菌種保藏、復壯及育種技術94
實驗56微生物的菌種保藏技術95
實驗57微生物菌種的復壯技術99
實驗58微生物的人工誘變育種技術101

十二、分子微生物學基礎技術操作114
實驗59聚合酶鏈反應(PCR)技術體外擴增DNA114
實驗60核酸電泳和瓊脂糖凝膠中DNA的回收117
實驗61PCR產(chǎn)物的克隆和質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌及其檢測119
實驗62氯化鈣法制備大腸桿菌感受態(tài)細胞121
實驗63大腸桿菌的電擊轉(zhuǎn)化123
實驗64用異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）誘導啟動子在大腸桿菌中表達克隆基因124
實驗65細菌DNA(G＋C)摩爾分數(shù)的測定126
實驗6616S rRNA序列分析及其同源性分析128
實驗67細菌原生質(zhì)體的融合131

十三、免疫學技術134
實驗68抗原與免疫血清的制備134
實驗69細菌的凝集實驗136
實驗70雙向免疫擴散實驗139
實驗71酶聯(lián)免疫吸附實驗140
實驗72蛋白質(zhì)印跡法142
實驗73熒光抗體技術144

第二部分食品微生物學綜合應用實驗技術/146
實驗74菌落總數(shù)的測定146
實驗75水的大腸菌群（M.R.N.）檢驗148
實驗76鮮牛乳自然發(fā)酵過程中微生物菌相變化測定151
實驗77甜酒釀的制作153
實驗78產(chǎn)蛋白酶菌株的篩選154
實驗79食品微生物實驗室環(huán)境中的微生物檢測156

附錄/159
附錄Ⅰ大腸桿菌最可能數(shù)(MPN)檢索表159
附錄Ⅱ常用培養(yǎng)基配方159
附錄Ⅲ常用染色液的配制184
附錄Ⅳ用Mega 4構建系統(tǒng)發(fā)育樹的過程185

參考文獻/196