生物工程實驗指導

第一章生物工程基礎實驗1
實驗1牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的制備及高壓蒸汽滅菌1
實驗2微生物細胞的顯微直接計數(shù)法5
實驗3質粒DNA分子轉化7
實驗4堿裂解法小量提取質粒DNA9
實驗5特異性DNA片段的PCR擴增13
實驗6小鼠脾細胞的體外分離培養(yǎng)15
實驗7動物細胞生長曲線的測定17
實驗8動物細胞的凍存和復蘇19
實驗9酶聯(lián)免疫吸附測定20
實驗10凝膠過濾色譜法檢測蛋白質分子量22
實驗11離子交換樹脂總交換容量的測定26
實驗12蛋白質含量的測定28
實驗13蛋白質的兩性性質及等電點的測定32
實驗14氨基酸的分離鑒定——紙色譜法34
實驗15植物體內(nèi)的轉氨基作用36
實驗16血清蛋白的醋酸纖維薄膜電泳39

第二章驗證性實驗41
實驗17牛乳中酪蛋白的提取41
實驗18雙水相體系中蛋白質分配系數(shù)的測定43
實驗19大蒜細胞SOD酶的提取與分離45
實驗20淀粉酶活性的測定48
實驗21影響酶活力的因素——正交試驗法51
實驗22細胞色素c的制備和含量測定54
實驗23植物組織中DNA的提取57
實驗24實驗室環(huán)境和人體表面微生物的檢查59
實驗25細菌的簡單染色法及革蘭氏染色法63
實驗26細菌的芽孢染色法及活細菌運動性觀察66
實驗27水中細菌總數(shù)的測定68
實驗28骨髓間充質干細胞體外培養(yǎng)和濃度計算70
實驗29SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質的分子量72
實驗30抗生素生物效價測定75

第三章綜合性實驗79
第一節(jié)海藻多糖的分離和性質研究79
實驗31海藻粗多糖樣品的制備80
實驗32海藻粗多糖中總糖含量的測定81
實驗33海藻粗多糖中還原糖含量的測定84
實驗34海藻粗多糖中蛋白質含量的測定85
實驗35海藻粗多糖中糖醛酸含量的測定87
實驗36海藻粗多糖中單糖組成分析88
實驗37海藻粗多糖的紫外光譜和紅外光譜分析90
實驗38海藻粗多糖的灰分分析92
第二節(jié)柑橘果膠的分離和性質研究94
實驗39皮渣的預處理95
實驗40微波輔助提取橘皮果膠96
實驗41超聲輔助提取橘皮果膠97
實驗42柑橘果膠中半乳糖醛酸含量的測定99
實驗43柑橘果膠中酯化度的測定101
第三節(jié)微生物發(fā)酵生產(chǎn)蛋白酶102
實驗44腐乳中產(chǎn)蛋白酶微生物的初篩及分離純化103
實驗45產(chǎn)蛋白酶微生物的搖瓶復篩105
實驗46產(chǎn)蛋白酶微生物的鑒定107
實驗47小型發(fā)酵罐發(fā)酵生產(chǎn)蛋白酶108
第四節(jié)生姜蛋白酶的提取純化111
實驗48生姜蛋白酶的提取及沉淀分離111
實驗49生姜蛋白酶的雙水相萃取分離114
實驗50生姜蛋白酶的反膠束萃取分離117
第五節(jié)大米生料釀酒工藝118
實驗51大米生料釀酒工藝及其控制119
實驗52成品檢測121

附錄124
附錄1實驗須知124
附錄2生物試劑常識125
附錄3常用緩沖溶液的配制125
附錄4旋光光度法128
附錄5相對密度的測定方法（2015版《中華人民共和國藥典》）129
附錄6熔點測定法（2015版《中華人民共和國藥典》）130
附錄7黏度測定法132
附錄8常用的微生物培養(yǎng)基及配制方法137
附錄9實驗室小型發(fā)酵罐滅菌及使用操作技術介紹142

參考文獻146