分子生物學實驗指導（供基礎(chǔ)、臨床、口腔、預防醫(yī)學類、生物科學專業(yè)用）

分子生物學實驗室安全規(guī)則
1．實驗室藥品試劑使用的注意事項
2．處理生物類廢棄物的基本方法
3．實驗室易制毒化學品
分子生物學實驗室常規(guī)設(shè)備簡介
1．實驗室操作及分析儀器室
2．離心機室
3．細胞培養(yǎng)室
4．細菌培養(yǎng)室
5．放射性核素操作室
6．暗室
7．其他設(shè)備
分子生物學常用實驗技術(shù)
1．電泳
1．1 瓊脂糖凝膠電泳
1．2 聚丙烯酰胺凝膠電泳
2．哺乳動物外周血白細胞高分子質(zhì)量DNA的提取
2．1 硅基質(zhì)膜吸附柱法
2．2 NH4Ac—核酸沉淀法
3．核酸濃度測定
3．1 紫外線分光光度法（紫外線吸收法）
3．2 溴乙錠—瓊脂糖凝膠電泳法（熒光光度法）
4．限制性核酸內(nèi)切酶消化DNA
5．凝膠電泳回收DNA（柱回收法）
6．DNA分子的體外連接
7．感受態(tài)細胞制備及大腸埃希菌轉(zhuǎn)化
8．重組質(zhì)粒的篩選和鑒定
8．1 插入失活
8．2 d互補（藍—白篩選）
8．3 酶切鑒定
9．質(zhì)粒DNA的提取與純化（堿裂解法）
10．Southern印跡雜交
11．探針標記和核酸分子雜交
11．1 利用32P標記DNA探針進行核酸分子雜交分析
11．2 采用地高辛標記DNA探針進行核酸分子雜交分析
12．細胞總RNA的提取
12．1 哺乳動物細胞RNA的提取
12．2 TRIzol試劑提取哺乳動物細胞RNA
12．3 哺乳動物細胞RNA提取（離心柱型）
12．4 植物總RNA的提取
13．Northern印跡雜交
14．PCR和RT—PCR
15．實時熒光定量PCR
16．DNA定點誘變技術(shù)
17．PCR—SSCP分析
18．細胞蛋白質(zhì)提取
18．1 細胞總蛋白提取
18．2 胞漿、胞核蛋白提取
19．外源基因在大腸埃希菌中表達和蛋白質(zhì)純化
20．蛋白質(zhì)濃度測定（BCA法）
21．蛋白質(zhì)免疫印跡法
22．細胞培養(yǎng)
22．1 細胞原代培養(yǎng)
22．2 細胞傳代培養(yǎng)
22．3 培養(yǎng)用品的清洗和消毒滅菌
22．4 細胞計數(shù)方法和細胞活力鑒定方法
23．細胞轉(zhuǎn)染
23．1 磷酸鈣轉(zhuǎn)染法
23．2 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法
24．細胞增殖檢測
24．1 細胞生長曲線
24．2 CCK一8測定細胞活力
24．3 細胞集落形成實驗
25．細胞凋亡檢測
25．1 常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳
25．2 Annexin—V／PI法檢測細胞凋亡
26．流式細胞術(shù)檢測細胞周期
27．細胞劃痕實驗
28．細胞Transwell侵襲實驗
29．雙熒光素酶服告基因?qū)嶒?br />30．RNA干擾技術(shù)
30．1 SiRNA干擾技術(shù)
30．2 慢病毒干擾技術(shù)
31．染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)（ChIP）
32．凝膠遷移阻滯實驗（EMSA）
33．DNase I足紋分析法
34．RNA免疫共沉淀（RIP）
35．蛋白質(zhì)的相互作用
35．1 免疫共沉淀
35．2 酵母雙雜交法
36．GST pull—down實驗
37．細胞免疫熒光染色
38．免疫組化
39．激光共聚焦熒光顯微鏡檢測技術(shù)
40．基因啟動子區(qū)CpG島預測及甲基化PCR引物設(shè)計
41．甲基化特異性PCR
42．miRlNA的提取和富集
42．1 常規(guī)分離方法
42．2 硅基質(zhì)離心柱法
43．miRNA靶基因的生物信息學預測
43．1 常用miRNA靶基因預測軟件簡介
43．2 預測軟件使用
44．文庫構(gòu)建
44．1 基因組DNA文庫構(gòu)建
44．2 cDNA文庫構(gòu)建
44．3 文庫的篩選與鑒定
45．常用生物信息學數(shù)據(jù)庫
45．1 常用核酸序列數(shù)據(jù)庫
45．2 常用蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫
46．核酸序列分析
46．1 序列比對
46．2 開放閱讀框分析
46．3 限制性核酸內(nèi)切酶酶切位點分析
46．4 基序的查找
46．5 外顯子、內(nèi)含子剪切位點分析
47．蛋白質(zhì)序列分析
47．1 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)分析
47．2 蛋白質(zhì)的疏水性分析
47．3 蛋白質(zhì)的跨膜結(jié)構(gòu)分析
47．4 信號肽的預測和識別
47．5 蛋白質(zhì)的卷曲螺旋預測
47．6 磷酸化位點的預測與識別