生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

第一章 實(shí)驗(yàn)基本技術(shù)

第二章 蛋白質(zhì)
實(shí)驗(yàn)一 蛋白質(zhì)分離
實(shí)驗(yàn)（一）凝膠層析分離牛血清白蛋白與溶茵酶
實(shí)驗(yàn)（二）薄層層析分離不同種類的氨基酸
實(shí)驗(yàn)（三）聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清蛋白質(zhì)
實(shí)驗(yàn)（四）二維蛋白質(zhì)電泳
實(shí)驗(yàn)（五）乙酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白
實(shí)驗(yàn)二 蛋白質(zhì)的性質(zhì)（呈色反應(yīng)）
買驗(yàn)（一）雙縮脲法顯色反應(yīng)
買驗(yàn)（二）茚三酮顯色反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)（三）黃色顯色反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)三 蛋白質(zhì)的性質(zhì)（沉淀反應(yīng)）
買驗(yàn)（一）鹽析沉淀法
實(shí)驗(yàn)（二）乙醇沉淀法
買驗(yàn)（三）重金屬鹽沉淀法
買驗(yàn)（四）有機(jī)酸沉淀法
買驗(yàn)（五）加熱使蛋白質(zhì)變性沉淀
實(shí)驗(yàn)四 蛋白質(zhì)的性質(zhì)（兩性解離和等電點(diǎn)）
買驗(yàn)（一）酪蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì)
實(shí)驗(yàn)（二）酪蛋白等電點(diǎn)的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)（三）聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)等電點(diǎn)
實(shí)驗(yàn)（四）牛乳中酪蛋白的制備
實(shí)驗(yàn)五 蛋白質(zhì)含量測(cè)定和純度鑒定
買驗(yàn)（一）凱氏定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)的含量
實(shí)驗(yàn)（二）雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量
實(shí)驗(yàn)（三）紫外吸收法測(cè)定蛋白質(zhì)的含量
實(shí)驗(yàn)（四）考馬斯亮藍(lán)G—250法測(cè)定蛋白質(zhì)的含量
實(shí)驗(yàn)（五）Folin—酚試劑（Lowry法）測(cè)定蛋白質(zhì)含量
實(shí)驗(yàn)（六）BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)含量
實(shí)驗(yàn)（七）SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)酶相對(duì)分子量及純度鑒定
實(shí)驗(yàn)（八）固定化蛋白質(zhì)的免疫生化鑒定（Western印跡）

第三章 核酸
實(shí)驗(yàn)一 核酸的分離
實(shí)驗(yàn)（一）離子交換柱層析分離核苷酸
實(shí)驗(yàn)（二）植物DNA的提取
實(shí)驗(yàn)（三）入噬菌體DNA提取
實(shí)驗(yàn)（四）鼠肝DNA的制備
實(shí)驗(yàn)（五）CTAB法小量制備大腸桿菌基因組DNA
實(shí)驗(yàn)（六）組織和細(xì)胞的RNA的制備
實(shí)驗(yàn)二 核酸組分鑒定
實(shí)驗(yàn)（一）肝組織中核酸的提取和核酸組分的鑒定
實(shí)驗(yàn)（二）酵母核糖核酸（RNA）的提取及組分鑒定
實(shí)驗(yàn)三 核酸濃度測(cè)定
實(shí)驗(yàn)（一）定磷法測(cè)定核酸的含量
實(shí)驗(yàn)（二）紫外吸收法測(cè)定核酸的含量
實(shí)驗(yàn)（三）化學(xué)法測(cè)定DNA的含量——二苯胺顯色法
實(shí)驗(yàn)（四）地衣酚顯色法測(cè)定RNA含量

第四章 維生素
實(shí)驗(yàn)一 維生素的提取
實(shí)驗(yàn)（一）總維生素C的提取與定量（2，4-二硝基苯肼法）
實(shí)驗(yàn)（二）胡蘿卜素的柱層析分離法
實(shí)驗(yàn)二 維生素的含量測(cè)定
實(shí)驗(yàn)（一）2，6—二氯酚靛酚滴定法測(cè)定還原性維生素C的含量
實(shí)驗(yàn)（二）磷鉬酸法測(cè)定維生素C的含量
實(shí)驗(yàn)（三）碘量法測(cè)定維生素C的含量

第五章 酶
實(shí)驗(yàn)一 酶的特點(diǎn)
實(shí)驗(yàn)（一）淀粉酶和蔗糖酶作用的特異性
實(shí)驗(yàn)（二）過(guò)氧化氫酶的高效性
實(shí)驗(yàn)二 酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)
實(shí)驗(yàn)（一）溫度對(duì)酶活性的影響
實(shí)驗(yàn)（二）pH值對(duì)酶活性的影響
實(shí)驗(yàn)（三）激活劑和抑制劑對(duì)酶活性的影響
實(shí)驗(yàn)（四）丙二酸對(duì)琥珀酸脫氫酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制
實(shí)驗(yàn)（五）4一氨基安替比林顯色反應(yīng)測(cè)定堿性磷酸酶Km
實(shí)驗(yàn)（六）磷鉬酸及磷鎢酸顯色反應(yīng)測(cè)定堿性磷酸酶Km
實(shí)驗(yàn)（七）脲酶Km值的簡(jiǎn)易測(cè)定法
實(shí)驗(yàn)三 酶的制備和活力
實(shí)驗(yàn)（一）枯草桿菌堿性磷酸酶的制備及酶活力的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)（二）3一磷酸甘油醛脫氫酶偶聯(lián)法測(cè)定血清醛縮酶活性
實(shí)驗(yàn)（三）酯酶的分離、純化與活性測(cè)定
實(shí)驗(yàn)（四）瓊脂糖凝膠電泳法分離乳酸脫氫酶同工酶
實(shí)驗(yàn)（五）大蒜細(xì)胞SOD的提取與分離

第六章 糖類
實(shí)驗(yàn)一 糖及糖原的提取鑒定
實(shí)驗(yàn)（一）堿性溶液法進(jìn)行肝糖原的提取與鑒定
實(shí)驗(yàn)（二）三氯乙酸法進(jìn)行肝糖原的提取和鑒定
實(shí)驗(yàn)二 血糖含量測(cè)定
實(shí)驗(yàn)（一）鄰甲苯胺法測(cè)定血清葡萄糖
實(shí)驗(yàn)（二）蒽酮比色法測(cè)定血清中葡萄糖含量
實(shí)驗(yàn)（三）GOD—PAP法測(cè)定血清葡萄糖
實(shí)驗(yàn)（四）Folin—Wu法測(cè)定血清葡萄糖
實(shí)驗(yàn)三 糖代謝
實(shí)驗(yàn)（一）糖酵解
實(shí)驗(yàn)（二）植物中丙酮酸含量的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)四 血糖調(diào)節(jié)
實(shí)驗(yàn)（一）腎上腺素和胰島素對(duì)家兔血糖濃度的影響
實(shí)驗(yàn)（二）運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌糖代謝的影響

第七章 脂類
實(shí)驗(yàn)一 脂類含量測(cè)定
實(shí)驗(yàn)（一）磷酸甘油氧化酶法測(cè)定血清甘油三酯
實(shí)驗(yàn)（二）異丙醇抽提、乙酰丙酮顯色法測(cè)定血清甘油三酯
實(shí)驗(yàn)（三）Hanus法測(cè)定不飽和脂肪酸的碘價(jià)
實(shí)驗(yàn)（四）氧化酶法測(cè)定血清總膽固醇含量
實(shí)驗(yàn)（五）鄰苯二甲醛直接顯色法測(cè)定血清總膽固醇的含量
實(shí)驗(yàn)（六）硫磷鐵法測(cè)定血清總膽固醇含量
實(shí)驗(yàn)二 脂類代謝
實(shí)驗(yàn)（一）肝的生酮作用
實(shí)驗(yàn)（二）酮體的生成及鑒定
實(shí)驗(yàn)三 脂類的提取
實(shí)驗(yàn)（一）卵磷脂的提取和定性鑒定
實(shí)驗(yàn)（二）瓊脂糖凝膠電泳分離血清脂蛋白
實(shí)驗(yàn)（三）薄膜層析法分離血清脂類

第八章 氨基酸
實(shí)驗(yàn)一 紙層析法測(cè)大鼠肌勻漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的氨基移換作用
實(shí)驗(yàn)二 二硝基苯腙顯色法測(cè)定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性
實(shí)驗(yàn)三 精氨酸酶在尿素形成中的作用
實(shí)驗(yàn)四 離子交換柱層析法分離氨基酸

第九章 分子生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)一 細(xì)菌質(zhì)粒DNA提取及紫外吸收法測(cè)定核酸的含量
實(shí)驗(yàn)二 質(zhì)粒DNA提?。ㄙ|(zhì)粒小量提取試劑盒）
實(shí)驗(yàn)三 質(zhì)粒DNA的酶切分析
實(shí)驗(yàn)四 質(zhì)粒載體與外源DNA片段的連接
實(shí)驗(yàn)五 CaCl2法制備Ecoli感受態(tài)細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)六 重組DNA的轉(zhuǎn)化和克隆篩選
實(shí)驗(yàn)七 瓊脂糖凝膠電泳分離DNA
實(shí)驗(yàn)八 利用PCR技術(shù)從質(zhì)粒擴(kuò)增DNA
實(shí)驗(yàn)九 RT—PCR方法
實(shí)驗(yàn)十 熒光定量PCR測(cè)定培養(yǎng)He1a細(xì)胞中GAPDH含量
實(shí)驗(yàn)十一 Southernb1ot實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)十二 Northernb1ot實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)十三 真核細(xì)胞DNA的制備與定量
實(shí)驗(yàn)十四 表達(dá)蛋白的分離與純化
實(shí)驗(yàn)十五 表達(dá)蛋白的生物學(xué)活性檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)十六 放射性同位素標(biāo)記的DNA序列測(cè)定分析
實(shí)驗(yàn)十七 細(xì)胞凋亡的分子生物學(xué)檢測(cè)方法
實(shí)驗(yàn)十八 測(cè)序技術(shù)
實(shí)驗(yàn)（一）非同位素銀染測(cè)序系統(tǒng)操作技術(shù)
實(shí)驗(yàn)（二）T7DNA聚合酶測(cè)序技術(shù)
實(shí)驗(yàn)十九 分子雜交技術(shù)
實(shí)驗(yàn)（一）雙鏈DNA探針及其標(biāo)記方法之切口平移法
實(shí)驗(yàn)（二）雙鏈DNA探針及其標(biāo)記方法之隨機(jī)引物合成法
實(shí)驗(yàn)（三）單鏈DNA探針及其標(biāo)記方法
實(shí)驗(yàn)（四）末端標(biāo)記DNA探針
實(shí)驗(yàn)（五）寡核苷酸探針
實(shí)驗(yàn)（六）菌落原位雜交
實(shí)驗(yàn)（七）斑點(diǎn)雜交

第十章 大實(shí)驗(yàn)和綜合實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)一 溶菌酶的提取和系列性質(zhì)測(cè)定
實(shí)驗(yàn)（一）實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
實(shí)驗(yàn)（二）酶的提取
實(shí)驗(yàn)（三）酶的純化
實(shí)驗(yàn)（四）酶活力、蛋白濃度測(cè)定
實(shí)驗(yàn)（五）酶促動(dòng)力學(xué)（Km測(cè)定、酶的抑制）
實(shí)驗(yàn)（六）SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)酶相對(duì)分子量及純度鑒定
實(shí)驗(yàn)二 酸性磷酸酯酶的提取分離、活性測(cè)定
實(shí)驗(yàn)（一）酸性磷酸酯酶的提取分離純化
實(shí)驗(yàn)（二）酶促反應(yīng)進(jìn)程曲線的制作
實(shí)驗(yàn)（三）酸性磷酸酯酶的酶活力測(cè)定
實(shí)驗(yàn)（四）凝膠層析法純化酸性磷酸酯酶
實(shí)驗(yàn)（五）考馬斯（Comessie）亮藍(lán)結(jié)合法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度
實(shí)驗(yàn)（六）酸性磷酸酯酶米氏常數(shù)的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)（七）酸性磷酸酯酶的檢測(cè)——SDS—PAGE電泳法
實(shí)驗(yàn)三 動(dòng)物和植物組織DNA的提取和鑒定
實(shí)驗(yàn)四 細(xì)胞色素C的制備和測(cè)定
實(shí)驗(yàn)五 血清中IgG的分離純化
實(shí)驗(yàn)六 紅細(xì)胞中SOD分離純化及活性鑒定
實(shí)驗(yàn)七 燕麥水解蛋白的制備和理化性質(zhì)測(cè)定
參考文獻(xiàn)

附錄
附錄1 常用緩沖溶液的配制
附錄2 常用酸堿摩爾溶液的配制
附錄3 常用酸堿指示劑的配制
附錄4 常用抗凝試劑的配制
附錄5 硫酸銨飽和度計(jì)算表
附錄6 色譜法常用數(shù)據(jù)
附錄7 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和數(shù)據(jù)處理